特色方案|川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的测定


发布时间:

2024-03-27

本文建立了川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex UP C18分析川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱,结果显示,新乌头碱理论塔板数大于2000,新乌头碱、次乌头碱、乌头碱与相邻杂质峰均基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的检测提供参考。 实验部分

本文建立了川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的HPLC测定方法。参照2020版《中国药典》色谱条件,采用色谱柱ShimNex UP C18分析川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱,结果显示,新乌头碱理论塔板数大于2000,新乌头碱、次乌头碱、乌头碱与相邻杂质峰均基线分离,满足《中国药典》要求。此方法可为川乌中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的检测提供参考。

实验部分


1.1    实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;

色谱柱:ShimNex UP C18(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01231-49);

纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器)

SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);

LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);

SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);

SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);

SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。

1.2    对照提取物溶液的制备

取乌头双酯型生物碱对照提取物(已标示新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量)20 mg,精密称定,置10 mL量瓶中,加0.01%盐酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度,摇匀,即得。

1.3    供试品溶液的制备

取本品粉末(过三号筛)约2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加氨试液3 mL,精密加入异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液50 mL,称定重量,超声处理(功率300W,频率40kHz;水温在25℃以下)30分钟,放冷,再称定重量,用异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液25 mL,40℃以下减压回收溶剂至干,残渣加0.01%盐酸甲醇溶液使溶解,转移至5 mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,精密吸取10 µL,注入液相色谱仪,测定。

分析条件


色谱柱:ShimNex UP C18(5 μm,4.6×250 mm;P/N:380-01231-49)

柱温:30℃

检测波长:235 nm

流速:1.0 mL/min

进样量:10 µL

流动相:A:0.2%冰醋酸溶液(三乙胺调pH值至6.20)

B:乙腈